1、一)应用范围不同 气相色谱法 分离能力好、灵敏度高、分析速度快、操作方便等。受技术条件的限制,沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析,一般对500℃以下不易挥发或受热易分解的物质部分可采用衍生化法或裂解法。
2、气相色谱和高效液相色谱的不同点:流动相不同、进样器不同、色谱柱长不同、分析种类有差异。流动相不同:hplc为液体流动相,gc为永久性气体作流动相(通常叫做载气)。进样器不同:高效液相为平头进样针,气相色谱为尖头进样针。色谱柱长不同:(1)气相色谱柱通常几米到几十米。
3、【答案】:(1)高效液相色谱法与经典液相色谱法异同点。①相同点 都是液相色谱,原理都相同。②不同点 a.分离效率高;b.灵敏度高;c.操作自动化;d.分析速度快。(2)高效液相色谱法与气相色谱法的异同点 ①相同点 都是利用物质在两项中分配系数不同而分离的。
4、相同点:仪器组成基本是一样的。流动相、进样装置、色谱柱、检测器,分析数据。都是色谱方法,所以基本原理是一样的。依靠分配比不同分离物质,色谱图解析基本也是一致的。横轴保留时间是特征,一个保留时间对应一个物质。纵轴电信号对应的是浓度。不同点:最大的不同点就是流动相吧。
5、关于流动相:气相色谱中流动相是惰性的,它对组分没有作用力,仅仅起运载作用,而高效液相色谱的流动相不仅起运载作用,而且流动相对组分有一定的亲和力,可以通过改变流动相种类和组成来提高分离的选择性,另外可以用作流动相的化合物也特别多,选择余地大。
高效:由于采用高压输送流动相,使样品在色谱柱中的移动速度增加,提高了分离效率。(2)快速:分析时间较经典液相色谱法大大缩短,一般少于1小时。(3)高灵敏度:采用高灵敏度的检测器,提高了检测限,可检测到微量的样品成分。
原理 高效液相色谱法仪根据各种各样的相互作用力来分离混合物。这种相互作用力通常是分析物及分析管柱之间的一种非共价性质。
高灵敏度:高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器,进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外,用样量小,一般几个微升。
高效液相色谱的基本原理如下:分离原理 高效液相色谱法主要利用混合物中各组分在固定相和流动相之间的分配平衡进行分离。在分离过程中,流动相携带样品通过固定相,不同组分在固定相和流动相之间的分配系数不同,因此会有不同的保留时间。
分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离,分离过程是一个分配平衡过程。高效液相色谱主要有4种,下面分别描述一下。液-固吸附色谱。固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相是吸附作用差异来分离的。吸附作用越强,K值越大保留时间越长。液-液分配色谱。
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。
样品量少,容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。
高效液相色谱法的特点是高压、高速、高效、高灵敏度、应用范围广、柱子可反复使用、样品量少、容易回收。高效液相色谱法有“四高一广”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
高效液相色谱法有“四高一广”的特点:高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
高效液相色谱法有“四高一广”的特点:(1)高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。(2)高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
特点:高压:液相色谱法以液体为流动相(称为载液),液体流经色谱柱,受到阻力较大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。一般可达150~350×105Pa。 高速:流动相在柱内的流速较经典色谱快得多,一般可达1~10ml/min。