1、流式细胞术（flow cytometry， FCM）是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。
2、CD11B： 单核细胞，巨噬细胞，中性粒细胞，NK细胞等；CD11C：树突细胞，单核细胞，巨噬细胞，中性粒细胞。流式细胞术是利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析及分选的技术。其测量速度快，最快可在1秒钟内检测上万个细胞。
3、流式细胞术已普遍应用于免疫学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等临床医学和基础医学研究领域。在肿瘤学中的应用这是FCM在临床医学中应用最早的一个领域。
4、流式细胞技术是当代最先进的细胞定量分析技术之一。该技术依托 流式细胞仪 。其主要部件为光源、流动室、荧光检测部件、分选器。（1）光源。通常是激光光源，目的是提供足够的荧光激光能量。（2）流动室。其为流式细胞仪中最重要的部分。目的是使细胞流稳定流动，依次通过固定的检测区。
5、细胞分选：根据需要，可以将不同类型的细胞进行分选，常用的分选方式有电荷静电分选、压缩空气分选、磁珠分选等。分选后的细胞可以用于进一步的实验或应用。总之，流式细胞术的基本原理是将细胞标记成不同类型并通过流式细胞仪进行多参数分析和排序。
原理：按检测需要标记了特异性荧光染料的单细胞悬液和鞘液，分别经硅化管进入流动室，形成鞘液包裹细胞悬液的稳态单细胞液柱，该液柱以稳定的层流形式通过喷嘴高速射下，液柱与水平方向的高度聚焦的激光束垂直相交，单细胞上标记的荧光染料在通过激光光束时被激发而产生特异性荧光。
流式细胞术是利用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒同时进行多参数、快速定量分析和分选的高新技术。其特点是：第一，只要样本制备成单个细胞或生物颗粒悬液均可以分析。第二，测量速度快，每秒中可以测量数千个乃至数万个细胞。第三，同时测量每个细胞的多参数特征。
原理：利用流式细胞术使单个细胞随着流体动力聚集的鞘流液在通过激光照射的检测区时，使光束发生折射、衍射和散射，散射光由光检测器接受后产生脉冲，脉冲大小与被照细胞的大小成正比，脉冲的数量代表了被照细胞的数量。
1、当然能导出了。有几个方法。如果你用的是BD的Diva软件，在记录所有数据后。在Experiment栏目上点右键，会有一个batch analysis的选项。点击后，会有几个结果输出选项，包括PDF打印。统计数据输出等等。你可以根据需要选择，并指定文件路径。就可以得到数据了。
2、最常见的是分析CD4， CD8亚群。先在FSC， SSC散点图上划出淋巴细胞gate。然后在此gate基础上选取T细胞标志染色阳性的细胞群（一般是CD3）。在把CD34阳性的细胞根据CD4 和CD8染色情况形式为散点图，得到CD4+/CD8-， CD4-/CD8+， 以及双阳性的比率。如果还有其他细胞标志的染色，再进一步分析。
3、先在FSC/SSC散点图gate出淋巴细胞；然后把淋巴细胞显示到柱状图，gate出CD3阳性的（T细胞）；再把T细胞显示到散点图，横坐标，纵坐标分别为CD4和CD8。
4、一般的设置是这样的：样本用CD3， CD4， CD8等T细胞特异性的抗体染色，并做好compensation。
5、因此，T淋巴细胞亚群的检测对控制这些疾病的发生发展、了解疾病的机制、指导临床治疗都有极其重要的意义。目前，最为快速和准确的T细胞亚群的检测方法是流式细胞术荧光标记法，即用抗人T细胞表面分化抗原的单克隆抗体进行免疫荧光标记，通过流式细胞仪检测T淋巴细胞各亚群的百分率或绝对计数。
1、 （一）单参数直方图 单参数直方图是一维数据用得最多的图形显示形式，既可用于定性分析，又可用于定量分析，形同一般X-Y平面描图仪给出的曲线。根据选择放大器类型不同，横坐标可以是线性标度或对数标度。用信道来表示，实质上是所测的荧光或散射光的强度。
2、假设你在这个图前面的步骤都是对的，包括设置gate，单细胞的gate等等。这两个图不具备可比性，第一个的图记录了超过1万个数据，而第二个只有2千多个。相差的很远。这是最大的错误。从现有的百分率来看，G1， G2的百分率也很接近。所以是看不出差别来的。
3、最常见的是分析CD4， CD8亚群。先在FSC， SSC散点图上划出淋巴细胞gate。然后在此gate基础上选取T细胞标志染色阳性的细胞群（一般是CD3）。在把CD34阳性的细胞根据CD4 和CD8染色情况形式为散点图，得到CD4+/CD8-， CD4-/CD8+， 以及双阳性的比率。如果还有其他细胞标志的染色，再进一步分析。
4、流式细胞术（flow cytometry， FCM）是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。
5、左边这张图每个峰下面积除以细胞数就是平均荧光强度，在流式细胞仪分析完结果后会出据平均荧光强度的数值，你可以看一下你的原始数据。
6、你这个分析的方法不对。从图上看，R1和R2都设的不对，首先，R1没有有效的去除细胞碎片，不应该包括最考左下角的那些点。排除细胞聚集，光靠一个FL2W是不够的，应该先通过FSCW和SSCW.就你提供的图来看，R2漏掉了向上的数据，如果是肿瘤细胞的话，就漏掉了3倍体和4倍体。
1、流式上机流程不包括以下步骤：样本制备：在流式上机之前，需要将待测样本进行适当的处理和制备，以满足流式细胞仪的检测要求。这一步通常包括细胞的洗涤、染色、固定等操作。样本加载：将制备好的样本加入到流式细胞仪中，准备进行检测。这一步需要确保样本的加入量适当，以获得准确的检测结果。
2、胞内染色：加入IFN-gamma；或IgG1的抗体20l，混匀，室温避光30分钟。加入2ml PBS，1000转，离心5分钟，弃上清。加入PBS 500l。上机前4度保存。1上机检测。
3、将这些液滴充以正负不同的电荷，当液滴流经带有几千伏特的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，不予充电的液滴落入中间的废液容器，从而实现细胞的分离。
4、大部分的实验在染色后都是要离心洗掉未染色的抗体。针对临床检测，或者类似的血样本检测，出于快速标准化，节省样本的目的，各试剂公司开发了很多no-wash protocol。这些方法大多都是先染色，在裂解红细胞，然后上机。
5、流式细胞术的应用 操作过程中的注意点 上机前处理 小心荧光淬灭 操作时必须严格按照孵育时间，如果抗体孵育时间过长，荧光是会逐渐淬灭的。那如果不得不推迟实验怎么办？可以把试管放在冰里面，这样会稍稍延长淬灭的时间。
（一）单参数直方图 单参数直方图是一维数据用得最多的图形显示形式，既可用于定性分析，又可用于定量分析，形同一般X-Y平面描图仪给出的曲线。根据选择放大器类型不同，横坐标可以是线性标度或对数标度。用信道来表示，实质上是所测的荧光或散射光的强度。
流式细胞仪的核心在于它的三大组件：液路系统、光路系统以及电子系统。液路系统如精密的舞者，通过鞘液的压力，让单个细胞在管路中形成精准的单列移动，确保了数据的精确性和一致性，如图1所示。
左边这张图每个峰下面积除以细胞数就是平均荧光强度，在流式细胞仪分析完结果后会出据平均荧光强度的数值，你可以看一下你的原始数据。
假设你在这个图前面的步骤都是对的，包括设置gate，单细胞的gate等等。这两个图不具备可比性，第一个的图记录了超过1万个数据，而第二个只有2千多个。相差的很远。这是最大的错误。从现有的百分率来看，G1， G2的百分率也很接近。所以是看不出差别来的。
最常见的是分析CD4， CD8亚群。先在FSC， SSC散点图上划出淋巴细胞gate。然后在此gate基础上选取T细胞标志染色阳性的细胞群（一般是CD3）。在把CD34阳性的细胞根据CD4 和CD8染色情况形式为散点图，得到CD4+/CD8-， CD4-/CD8+， 以及双阳性的比率。如果还有其他细胞标志的染色，再进一步分析。
你这个分析的方法不对。从图上看，R1和R2都设的不对，首先，R1没有有效的去除细胞碎片，不应该包括最考左下角的那些点。排除细胞聚集，光靠一个FL2W是不够的，应该先通过FSCW和SSCW.就你提供的图来看，R2漏掉了向上的数据，如果是肿瘤细胞的话，就漏掉了3倍体和4倍体。
